วัตถุประสงค์ของการตรวจวิเคราะห์ยาสูบของกรมสรรพสามิต

วัตถุประสงค์ของการตรวจวิเคราะห์ยาสูบของกรมสรรพสามิต
1. ตรวจวิเคราะห์ว่ามีลักษณะเป็นสินค้ายาสูบตามพระราชบัญญัติยาสูบ พ.ศ.2509 หรือไม่ 
 2. ตรวจวิเคราะห์สารปรุงแต่งในยาสูบ



การวิเคราะห์หาปริมาณนิโคตินและวานิลลินในยาสูบ

สารเคมี

     - Methanol (HPLC Grade)
     - Orthophosphoric Acid
     - Triethylamine
     - Hydrochloric Acid
     - D₂O (Deionized Water ผ่าน Millique)
     - Standard Nicotine (1 – Methyl – 2 - [ 3 - Pyridyl ] - Pyrolidine)

เครื่องมือและอุปกรณ์

     - เครื่อง High Performance Liquid Chromatography

  

  สภาวะของเครื่อง

       Column : Spherisorb C18 ODS ขนาด 4.6 x 250 มม. 0.5 ไมครอน
       Mobile Phase : Methanol - Buffer ; 70 : 30
       Buffer : 0.2 % Orthophosphoric Acid ปรับ pH 7.25 ด้วย Triethlamine
       Flow Rate : 0.8 ml / min
       Injection Volumn : 10 ไมโครลิตร
       Detector UV : 254 nm     

วิธีวิเคราะห์

     - เตรียม Mobile Phase (Methanol : Buffer = 70 : 30)
       Buffer : 0.2% Orthophosphoric Acid ปรับ pH 7.25 ด้วย Triethylamine

     - เตรียมสารละลายมาตรฐานนิโคตินที่ความเข้มข้นต่าง ๆ
       โดยใช้เมทธานอลเป็นตัวทำละลาย แล้วฉีดเข้าเครื่อง HPLC จะได้กราฟมาตรฐานของนิโคติน

     - เตรียมตัวอย่างยาสูบ
       ชั่งตัวอย่างยาสูบ 0.5 กรัม เติมน้ำกลั่น D₂O 40 มิลลิลิตร นำไปเขย่าที่ 140 รอบ/นาที เป็นเวลา 1 ชั่วโมง แล้วกรองสารละลายด้วยกระดาษกรองขนาด 0.45 ไมครอน ใส่ขวดตัวอย่าง นำไปฉีดเข้าเครื่อง HPLC จะได้ค่าความเข้มข้นเป็นปริมาณนิโคตินเมื่อเทียบกับกราฟมาตรฐาน